胎牛血清(FetalBovineSerum,簡稱FBS)是一種常用于細胞培養(yǎng)的血清,胎牛血清富含多種生物活性成分,包括生長因子、激素、營養(yǎng)物質等。這些成分對于細胞生長、分化和代謝具有重要作用。在細胞培養(yǎng)中,胎牛血清通常被用作培養(yǎng)基的添加劑,以提供細胞生長所需的營養(yǎng)物質和生長因子。...
細胞轉染指的是將外源分子如DNA、RNA等導入到真核細胞內部的技術。隨著基因和蛋白功能研究的深入,轉染已經成為科研實驗中常用的技術手段之一。對于細胞轉染實驗,轉染試劑、轉染方法、細胞狀態(tài)等都會影響到細胞轉染的效率,本文主要對影響細胞轉染效率的8個因素做一介紹。1.轉染試劑瞬時轉染和穩(wěn)定轉染可以選擇不同的轉染試劑,轉染試劑的選擇又可以根據已經發(fā)表的文獻,已經有很多細胞株被成功轉染,通過文獻資料可以參考最適的轉染試劑,當然也要根據不同的實驗需求選擇。一般來說轉染試劑的要求是低毒,...
1、如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。2、血清中包含絮狀...
轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。分為物理介導方法:電穿孔法、顯微注射和基因槍;化學介導方法:如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法:有較為原始的原生質體轉染,和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介導的轉染技術,是目前轉染效率較高的方法,同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是病毒轉染方法的準備程序復雜,常常對細胞類型有很強的選擇性,在一般實驗室中很難普及。其它物理和化...
細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結條件下,細胞內水分透...
原代細胞(primaryculturecell)是指從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人把培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫(yī)學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫(yī)藥產業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。細胞轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉...
轉染是采用除病毒感染外的其他方法將核酸(DNA或RNA)人工導入細胞的過程。采用各種化學、生物學或物理方法導入外源性核酸會改變細胞的特性,從而實現細胞基因功能和蛋白質表達研究。轉染后,導入的核酸可以瞬時性地存在于細胞內,只表達一段時間且不會復制,也可以穩(wěn)定地整合至受體基因組內,隨著宿主基因組的復制而復制,各種基因輸送系統(tǒng)采用的術語與該領域的技術進展步調一致,并進一步區(qū)分不同的方法和細胞類型。轉染技術作為一種分析工具,可將外源基因導入真核細胞,有助于機體表征遺傳、蛋白質合成、細...
電話
微信咨詢
關注公眾號